点击量:220 时间:2016-06-25
生化仪的工作原理是通过不同成分对光的吸收程度不同进行检测的,在吸光度检测中,有采用单波长方式,也有采用双波长方式,该如何选择呢?其实这不是人为选择的,而是根据其检测成分来确定的。
山东国康全自动生化仪的参数中关于测量波长是这样描述的:300-800nm(单/双波长),什么是单波长与双波长呢?它的检测原理及作用是什么。
一、单波长和双波长的概念
采用一个波长检测物质的光吸收强度的方式成为单波长方式。当反应液中含有一组分,或在混合反应液中待测组分的吸峰与其他共存物质的吸波长无重叠时,可以选用。使用一个主波长和一个次波长的城双波长方式。当反应液中存在干扰物的较大吸收、从而影响测定结果的准确性时,采用双波长方式更好。
二、双波长的作用:
1、消除噪音干扰。
2、减少杂散光影响。
3、减少样品本身光吸收的干扰:当样品中存在非化学反应的干扰物如甘油三酯、血红蛋白、胆红素等时,会产生非特异性的光吸收,双波长方式可以部分消除这类光吸收干扰。
三、生化仪波长的确定方式:
当被测物的主波长确定以后,根据干扰物吸收光谱特征选择次波长,是干扰物在主、次波长处又尽可能相同的光吸收值,而被测无在主、次波长处的光吸收值应有较大差异。一般来说,次波长应大于主波长100mm。一主波长与次波长吸光度差来计算结果。
四、双波长的具体应用:
生化仪对于某些反应速度快且无法设置为两点终点法的分析项目,尤其是单试剂分析中,可以利用双波长的方式来部分消除样品本身的光吸收干扰。目前用单试剂法测定的项目应用双波长的为血清总蛋白(双缩脲法)主波长500nm,次波长576nm;血清白蛋白(溴甲酚氯法)主、次波长分别为600和700nm;钙(偶氮砷Ⅲ法)主、次波长分别为660、770nm;磷(紫外比色法)主、次波长为340、405nm,镁(二甲苯胺蓝法)主、次波长为505和600nm。
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